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Discussione

liciageno
Nuovo Arrivato

107 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2012 : 12:53:47

Ciao!
Ho 3 aliquote di DNA che ho estratto da 3 bande da gel di agarosio.
Vorrei concentrare il DNA e mettere tutto insieme in un aliquota in un volume corrispondente a quello che avrei normalmente in un aliquota (50uL). Come posso fare? Centrifugo?
Vi ringrazio

roberta.s
Utente Junior

Citt�: Parigi

564 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2012 : 12:58:33

Unisci i tre campioni in un unico tubo, poi procedi nel seguente modo:
- Add H2O up to 100 uL
- Add 2 vol EtOH 100% freddo (-20 �C)
- Add 1 uL glicogeno (soluzione 20 mg/mL) / 100 uL soluzione iniziale
- Incubare a -20 �C 20�
- 12000 x g 15�
- Buttare il sup
- Lavare in 2 vol EtOH 70%
- 12000 x g 10�
- Buttare il sup
- Asciugare il pellet all�aria
- Risospendere in H2O sterile (nel tuo caso 50 uL)

roberta.s
Utente Junior

Citt�: Parigi

564 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2012 : 12:59:56

nb: la centrifuga va impostata a 4�C