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Andre85
Nuovo Arrivato

63 Messaggi

Inserito il - 17 aprile 2012 : 17:16:50

Ciao a tutti. Volevo chiedere se qualcuno di voi ha esperienza con il Western Blot per rilevare la proteina APOB100 su lisati cellulari, in particolare io uso le FAO (epatoma di ratto). Il mio problema è che non riesco a identificare una banda che mi compare intorno a 75/70 Kda, premetto che non riesco a vedere APOB 100 in quanto il Running Gel ha una percentuale di Poliacrilamide del 10% troppo stringente per una proteina di 512 Kda. Ho pensato anche di fare un gel in gradiente dal 6% al 10% per riuscire a farla entrare, in letteratura è riportata questa metodica ma il mio collega che ha messo appunto il protocollo faceva un gel al 10% e da quanto ne so non ha mai rilevato APOB 100 ma altre bande che non riesco a identificare..se qualcuno mi può aiutare ne sarei felice..grazie!

Andre85
Nuovo Arrivato

63 Messaggi

Inserito il - 17 aprile 2012 : 17:32:33

No scusate, gel dal 3% al 10%...