domanda esame ingegneria genetica

Forum

Registrati Discussioni Recenti Preferiti Utenti Cerca Regolamento RSS Statistiche

Utilità

I libri
consigliati:

Biologia marina
Giuseppe Cognetti, Giuseppe Magazzù, Michel Sarà

Post-human. Verso nuovi modelli di esistenza
Roberto Marchesini

Biodiversità, estinzione e conservazione. Fondamenti di ecologia del paesaggio
Autori Vari

Altri Libri

Nome Utente:	Password:
Riconoscimi automaticamente

Tutti i Forum

MolecularLab

Biologia Molecolare

domanda esame ingegneria genetica

Nuova Discussione

Nuovo Sondaggio

Rispondi

Aggiungi ai Preferiti

Cerca nelle discussioni

Risorse di Biologia Molecolare:

Didattica

Blog Inside the Cell

Protocolli

Siti di Biologia Molecolare e Tecniche

Quiz

Ultime notizie

Aggiungi i tag

Quanto è utile/interessante questa discussione:

Autore

Discussione

dulcinea.88
Nuovo Arrivato

7 Messaggi

Inserito il - 22 giugno 2012 : 10:57:21

ciao a tutti! ho avuto il modo di avere alcune domande dello scritto di ingegneria genetica che avrò il 2 luglio, e tra queste ce n'è una in particolare a cui non saprei proprio rispondere, qualora mi capitasse, spero mi possiate aiutare!

la domanda è questa:
come si può clonare un frammento di dna ad estremità nette, prodotto di pcr o della sintesi di cDNA? è possibile clonarlo in modo orientato? discutere

per caso c'entra qualcosa la strategia di Maniatis???

preposizione
Nuovo Arrivato

12 Messaggi

Inserito il - 24 giugno 2012 : 14:50:09

non so cosa sia la "strategia di maniatis"....
so che è un libro e che per giunta non ho mai letto...

comunque: no, con estremità blunt (nette o cieche) non puoi fare inserzione direzionale.
pensaci: hai un plasmide digerito con un enzima che crea estrmità blunt. e hai un frammento di pcr blunt. questo è ovvio che può inserirsi come gli pare, dritto o storto, in medesima proporzione.

comunque in generei i clonaggi si fanno digerendo il plasmide e inserendovi il frammento che viene legato con enzima T4 ligasi.

se le estremità sono blunt il clonaggio è comunque più difficile perchè è anche più facile che il plasmide si richiuda piuttosto che accetti la nuova sequenza. quindi in genere si defosforila dopo digestione blunt. pr aumentare l'efficienza di ligazione evitando che il plasmide si richiuda.
spro di esserti stata d'aiuto. in caso scrivi.
ciao

GFPina
Moderatore

Città: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 24 giugno 2012 : 15:16:32

Come fai ad avere in anticipo le domande per un esame?

Devi renderlo sticky, ci sono varie strategie, sono sicura che al corso avete affrontato questo argomento.