Scusate se pongo questa domanda ma leggendo le vecchie discussioni non riesco comunque a trovare quello che cerco. Vorrei capire perchè per staccare le cellule si usa una soluzione in cui oltre alla tripsina c'è l'EDTA. So che è forma complessi con i cationi, ma in una discussione ho letto che sequestra il magnesio e impedisce l'azione della tripsina... ma perchè allora si usa con la tripsina?? Grazie in anticipo a tutti
Io uso una tripsina/EDTA per staccare le cellule... e credo l'EDTA permette che si stacchino piú facilmente con rispetto alla tripsina sola grazie alla sua capacita chelante di ioni Ca++. Pero non so del Mg++.
Non ti so rispondere con certezza, ma se qualcuno me lo chiedesse risponderei che forse l'EDTA permette anche di chelare il calcio, che è un cofattore fondamentale per molti tipi di proteine d'adesione (tipo caderine e integrine), e può facilitare così il distacco delle cellule dal substrato. Ma forse è una baggianata..