Modificare il threshold in una qRT-PCR????

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sparkina
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6 Messaggi

Inserito il - 17 settembre 2012 : 17:13:47

Ciao a tutti!

Qualcuno sa dirmi se e con che criterio posso modificare manualmente il threshold in un'analisi qRT-PCR?

Utilizzo un Rotor-Gene Q che mi calcola automaticamente il threshold delle mie corse.
E' capitato per� che diversi campioni abbiano lo stesso CT, perci� l'analisi quantitativa non fornisce un CT ma d� negativa la quantificazione perch� in presenza di multi-CT.

Ho provato ad aumentare manualmente il threshold e in effetti man mano che aumento il suo valore mi "escono" i vari CT (ovviamente i CT che gi� erano presenti cambiano valore).

La mia domanda quindi �: se cambio il threshold del gene di riferimento, come faccio a sapere di quanto devo cambiare il threshold del gene di interesse per mantenere il rapporto e quindi una corretta quantificazione?

Grazie mille!!