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Lorydd
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17 Messaggi

Inserito il - 28 settembre 2012 : 19:22:34

Salve ragazzi!
Ho un dubbio..devo ordinare un plasmide che contenga le sequenze WT di un gene che voglio anlizzare in HRM. Amplifico circa 11 frammenti esonici in cui sono state identificate diverse mutazioni puntiformi. I primer sono stati disegnati in modo da amplificare frammenti lunghi circa 200bp (misura ottimale per l'HRM).
La mia idea iniziale era quella di ordinare un plasmide per ogni amplicone disegnato..costoso e laborioso...
Ora ho pensato di farne uno unico con le sequenze WT una dietro l'altra..in questo modo userei lo stesso plasmide.
Ma..secondo voi..devo mettere qualche nucleotide in pi� tra un amplicone e l'altro?
Spero qualcuno mi sappia consigliare!!!!
Grazie
Buon venerdi sera e buon weekwnd