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olioli
Nuovo Arrivato
11 Messaggi |
 Inserito il - 25 ottobre 2012 : 10:17:01
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ciao a tutti, qualcuno di voi ha mai fatto gel a gradiente per separazione di proteine? potrebbe spiegarmi brevemente come ha fatto? grazie ciao
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jerne
Nuovo Arrivato
9 Messaggi |
Inserito il - 25 ottobre 2012 : 12:54:15
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| Devi avere un formatore di gradienti, costituito da due camere cilindriche comunicanti tra loro, ma dotate di due rubinetti: uno all'uscita del primo cilindro, l'altro che chiude il canalino tra il primo ed il secondo cilindro. Bisogna mettere la soluzione più concentrata di acrilammide nel cilindro più vicino all'uscita (con entrambi i rubinetti chiusi, ovviamente), insieme con un piccolissimo magnetino che provvederà a mescolare gradualmente le due soluzion la soluzione a concentrazione minore di acrilammide la metti nel cilindro più lontano dall'uscita, metti il tutto su un agitatore magnetico, colleghi l'uscita al casting stand con i vetri già in posizione (ci sono anche Multi-casting stand), accendi l'agitatore magnetico e apri i due rubinetti. Devi usare un po' meno catalizzatore del solito per evitare che il tutto polimerizzi nel formatore, ma funziona bene: in gioventù ne ho fatti tantissimi! oggi però trovi i gel già pronti e con diversi tipi di gradiente, lineare, non lineare, a diverse concentrazioni. |
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