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Atterual
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5 Messaggi |
Inserito il - 27 giugno 2013 : 12:10:34
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Ciao a tutti. Ho cercato nel forum ma non ho trovato delle informazioni utili riguardo all'utilizzo delle colonnine di purificazione del DNA plasmidico (in particolare plasmid miniprep kit della BIORAD). Non capisco come funzioni esattamente il Washing buffer che elimina solamente le impurità ma lascia legato il DNA alla matrice in silice, mentre quando si fanno i lavaggi con l'H2O il DNA si stacca. Come fa l'H2O a staccare gli acidi nucleici? ed il washing buffer nn contiene H2O? [Alcuni link di conversazioni vecchie non funzionano più ]
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domi84
Moderatore
  

Città: Glasgow
1724 Messaggi |
Inserito il - 27 giugno 2013 : 16:02:29
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Solitamente quei wash solution contengono un'alta percentuale di etanolo (70%) che fa precipitare il DNA, che quindi resta bloccato nella resina. Quando aggiungi acqua il DNA si risospende e attraversa la resina... |
Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/ Le foto che ho scattato... |
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Atterual
Nuovo Arrivato
5 Messaggi |
Inserito il - 27 giugno 2013 : 16:53:05
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ok grazie! nel frattempo avevo trovato anche che dipende dalla costante dielettrica... però va bene così, abbastanza chiaro! :) |
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GFPina
Moderatore
    

Città: Milano
8408 Messaggi |
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Atterual
Nuovo Arrivato
5 Messaggi |
Inserito il - 27 giugno 2013 : 17:52:48
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ah va bene... non trovavo nulla perchè cercavo troppo specificatamente la purificazione con la colonnina  |
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