Problemi Western Blot

Forum

Registrati Discussioni Recenti Preferiti Utenti Cerca Regolamento RSS Statistiche

Utilità

I libri
consigliati:

Complesso e organizzato.
Giovanni Villani

Genetica molecolare
Rolf Knippers

Fondamenti di biochimica
Charlotte W. Pratt, Donald Voet, Judith G. Voet

Altri Libri

Nome Utente:	Password:
Riconoscimi automaticamente

Tutti i Forum

MolecularLab

Biologia Molecolare

Problemi Western Blot

Nuova Discussione

Nuovo Sondaggio

Rispondi

Aggiungi ai Preferiti

Cerca nelle discussioni

Risorse di Biologia Molecolare:

Didattica

Blog Inside the Cell

Protocolli

Siti di Biologia Molecolare e Tecniche

Quiz

Ultime notizie

Aggiungi i tag

Quanto � utile/interessante questa discussione:

Autore

Discussione

Penelope12
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 15 dicembre 2014 : 13:33:58

salve. ho un problema con il western. provo a spiegarvi. sto lavorando con campioni di sarcoidi e sto analizzando l'espressione del collagene I e III. ho letto che si devono usare condizioni non riducenti e perci� nei campioni non aggiungo il B mercapto. ho usato 40 ug ho preparato i campioni bolliti spinnati e caricati su un gel al 7.5%. la corsa sembra non dare problemi... faccio il traferimento vedo al ponceau e noto solo alcuni smear mentre la maggior parte delle proteine si trova in alto...(in realt� le uniche proteine che migrano correttam mi hanno detto che sono del serio tipo la banda visibile al ponceau all altezza di 55 kDa) aggiungo l'anticorpo e mi ritrovo effettivam tutte le proteine nella prima fase del running. qualcuno ha mai avuto qst problema? potrebbe aiutarmi? o magari qlk ha usato un particolare procedimento per visualizzare il collagene? ho pensato potesse essere il gel, cosi ho usato il pre cast e uno fatto con soluzioni di un altro lab, ho cambioato il laemmli ma in ogni caso il risultato � lo stesso! vi allego le immagini del ponceau e dello sviluppo! spero che qlk possa aiutarmi
grazie

Immagine:

6,8�KB

Immagine:

288,59�KB

GFPina
Moderatore

Citt�: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 16 dicembre 2014 : 20:36:18

Per favore non duplicare le discussioni nel forum.