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Spugno
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5 Messaggi
Inserito il - 05 febbraio 2015 : 09:25:53  Mostra Profilo Invia a Spugno un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti, ho un dilemma che mi assilla e non riesco a capire; mi chiedevo: perchč nell'ambito del Wester Blot ottengo bande ad altezze diverse utilizzando due anticorpi differenti contro la stessa proteina?
scusate la domanda, magari per alcuni banale, ma non riesco proprio a capire.Grazie mille in anticipo!

lą
Utente Junior



565 Messaggi
Inserito il - 05 febbraio 2015 : 10:15:43  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di lą Invia a lą un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Che epitopo riconoscono?
Forse succede perchč la tua proteina si degrada. Qui una collega lavora con una proteina e utilizza due anticorpi diversi per la rilevazione in Western: uno riconosce l'epitopo all'N terminale e allora vede diverse bande frutto di degradazione; l'altro riconosce un secondo epitopo (non ricordo bene quale) e allora vede una singola banda.
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Spugno
Nuovo Arrivato



5 Messaggi
Inserito il - 05 febbraio 2015 : 10:31:32  Mostra Profilo Invia a Spugno un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao, grazie mille per la risposta! ma la mia domanda č pił teorica, ovvero, perchč nei datasheet di due anticorpi differenti che riconoscono la stessa proteina viene riportato che uno da una banda a 53 kDa mentre l'altro la dą a 35 kDa? alla fine riconoscono la stessa proteina; non capisco questa cosa. Comunque aggiungo che uno riconosce come epitopo la porzione C-terminale della proteina e dą una banda a 55 KDa, mentre l'altro riconosce l'intera proteina e dą una banda a 37 kDa.

grazie ancora per la risposta!
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lą
Utente Junior



565 Messaggi
Inserito il - 05 febbraio 2015 : 11:28:57  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di lą Invia a lą un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Magari gli anticorpi riconoscono due isoforme della proteina.
Che proteina č?
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Spugno
Nuovo Arrivato



5 Messaggi
Inserito il - 05 febbraio 2015 : 11:45:45  Mostra Profilo Invia a Spugno un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
la proteina č XRCC4 che interviene nella NHEJ; ha tre isoforme ma diferiscono l'una dall'altra solo per pochi AA C-terminali; le sequenze peptidiche delle tre sono identiche.
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