Autore |
Discussione |
|
RGB
Nuovo Arrivato
11 Messaggi |
Inserito il - 20 aprile 2015 : 08:43:38
|
Buongiorno a tutti, ho un quesito da porvi. Devo fare una RIP (RNA-immunoprecipitation), sono riuscita a settare i parametri in merito alla quantità di estratto proteico e anticorpo da utilizzare ma da settimane ormai, ottengo solo RNA degradato. Qualcuno mi può dare un suggerimento/ un trucco in più per evitare la degradazione? Grazie
|
|
|
domi84
Moderatore
  

Città: Glasgow
1724 Messaggi |
Inserito il - 20 aprile 2015 : 23:15:24
|
Quanta esperienza hai con l'RNA? C'è poco da fare: hai qualcosa contaminato da RNasi, devi scoprire cos'è e eliminarlo. Usi i guanti? Come estrai l'RNA? Trizol? Prepara le soluzioni di EtOH, Isop., e acqua nuove. Usi le punte con filtro? Come sai che è degradato? Lo corri su gel? Hai lavato il lettino con NaOH? |
Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/ Le foto che ho scattato... |
 |
|
RGB
Nuovo Arrivato
11 Messaggi |
Inserito il - 21 aprile 2015 : 16:44:38
|
Grazie per aver risposto. Faccio tutto con i guanti e sotto cappa. Uso il trisure che è simile al trizol e preparo tutte le soluzione col l'acqua DEPC. oltre a correrlo su gel e vedere il classico smear di degradazione leggo al biofotometro e il rapporto 260/230 è sempre molto basso. |
 |
|
domi84
Moderatore
  

Città: Glasgow
1724 Messaggi |
|
|
Discussione |
|