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kachy
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 Inserito il - 18 maggio 2018 : 15:29:34
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Ciao a tutti, mi è stato chiesto di fare un gel nativo di alcune proteine.
Vorrei sapere, come faccio calcolare i microgrammi di proteina caricati in ogni pozzetto?
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domi84
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kachy
Nuovo Arrivato
41 Messaggi |
Inserito il - 19 maggio 2018 : 09:51:05
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No, intendo proprio determinare i ug di campione caricati sul gel. Nel senso, se carico 10ul di campione nel gel quanti ug sto caricando?
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domi84
Moderatore
Città: Glasgow
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kachy
Nuovo Arrivato
41 Messaggi |
Inserito il - 22 maggio 2018 : 09:30:37
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Buongiorno, ci ho ragionato un attimo:
io ho uno stock di proteina a 50uM di un peso di 14kDa.
La formula della concertazione C = n/V può essere riscritta in termini di g/V , scomponendo il numero di moli (n = g/PM), perciò attengo che:
g/V = C*PM --> teoricamente se pongo C = 1mM allora= g/V= 1mM * 14kDa = 14mg/ml (ug/ul)
poiché il mio campione è 50uM, posso calcolare la seguente proporzione:
1000uM : 14ug/ul = 50uM : X ---> X = 0,7ug/ul
perciò se devo caricare 5ug della mia proteina nel gel dovrò calcolare:
0,7ug : 1ul = 5ug : x ---> 7.14ul di campione da caricare ( a cui dovrò aggiungere il SB)
giusto?
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