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kiki
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97 Messaggi

Inserito il - 12 agosto 2019 : 20:09:58

Scritto da MolecularLab Mobile

Ciao a tutti,
Ho un dubbio su una diluizione. Se ho una madre di dNTPs da 100nM e voglio una diluizione 10nM per esempio in un volume di 50ul,dovr� mettere 5ul di madre e 45 di H20 giusto? In lab abbiamo un'aliquota di dNTPs in cui han scritto sopra 10nM fatta mettendo 20ul di ogni dNTPs e 120 di H2O ..In un protocollo in cui era richiesto di mettere 0.8 ul di ogni dNTPs a 10nM io ho messo invece 3.2 ul dell'aliquota 10nM con tutti e 4 i dNTPs dentro..e la Pcr � venuta molto molto debole e il mio tutor mi ha detto che � perch� ho sbagliato a usare l'aliquota ho messo troppo pochi dNTPs e ha fatto un rapido calcolo dicendomi un circa 12nM..ma secondo voi che calcolo ha fatto? Con L'aliquota fatta con tutti e 4 i dNTPs mettendo 20ul di ognuno e 120 di H20 non ottengo cmq che ogni dNTPs � a 10nM?

Grazie in anticipo!!