Salve a tutti, vorrei chiedervi se qualcuno di voi ha mai utilizzato la linea cellulare THP1 e se si che tipo di buffer ha utilizzato per l'estrazione proteica. Io di solito con i linfociti uso RIPA buffer piu' inibitori, ma con questa linea ottengo sempre concentrazioni di proteine basse. Premetto che le cellule in coltura stanno bene. Grazie
Io non ho mai usato la linea cellulare THP1, pero' se vuoi provare di sperimentare la miscela di lisi 4 x la ricetta e' questa. Il mio consiglio e' quello di provare. La procedura di lisi e' come per quella del ripa buffer.
Miscela di lisi 4X
0.2 M Tris-HCl pH 6.8 4% SDS 20% 8 mM EDTA 4% 2- Mercaptoetanolo 40% glicerolo