Citazione:

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da topic: http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=286

Messaggio inserito da Luis 22

OLA-PCR:

- Dopo la PCR, si usano 2 tipi di sonde diverse.
- Le prime sono sonde specifiche sia per la sequenza normale che mutata e presentano al 5’ dei modificatori di mobilità di diversa lunghezza, per favorire la separazione in una corsa elettroforetica.
- Il secondo tipo sono sonde (fosforilate in 5’ e legate ad una molecola fluorescente in 3’) complementari alla sequenza adiacente alla mutazione in esame
- Si usa dopo una ligasi che unisce questi due tipi sonde che si sono legate al DNA bersaglio, discriminando tra quelle con complementarietà completa ed incompleta
- La visualizzazione dei risultati avviene mediante elettroforesi capillare

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