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mandolino
Nuovo Arrivato
Città: Trondheim
17 Messaggi |
 Inserito il - 06 maggio 2008 : 08:52:53
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Ciao, devo clonare un frammento di 3700bp, che ottengo per PCR inversa, in pMOSblue ma la concentrazione e' talmente bassa (circa 14ng) che non riesco a farlo incorporare..ho provato a fare un PCR sul prodotto di PCR ma ottengo solo aspecifici..cosa suggerite per ottenere una concentrazione maggiore di frammento?
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darkene
Utente Junior
291 Messaggi |
Inserito il - 06 maggio 2008 : 14:46:38
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| fare più reazioni di PCR, unirle, precipitarle e risospenderle in un volume più piccolo. anche io in tesi dovevo clonare una regione promotrice di 5000bp e avevo il tuo problema. così ho risolto! |
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mandolino
Nuovo Arrivato
Città: Trondheim
17 Messaggi |
Inserito il - 06 maggio 2008 : 15:48:35
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| Grazie mille! credo proprio che procedero' in questo modo! |
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cicciola dott
Nuovo Arrivato
Prov.: Bari
Città: bari
5 Messaggi |
Inserito il - 07 maggio 2008 : 00:49:50
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strano che tu ottenga sempre aspecifici....
nn pensi alla mix inquinata...??
l'unico modo è uello ke ti hanno suggerito poi x concentrare al limite ci sono le clonnone della millipore |
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basse concentrazioni di DNA e subcloning
Didattica
