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magda1981
Nuovo Arrivato
19 Messaggi |
 Inserito il - 09 giugno 2008 : 12:55:09
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ciao!
ho un problema.....
sto valutando l'efficacia dei miei primer in real time pcr con sybr green!
dopo amplificazione nella curva di melting ho un solo picco quindi deduco che non ho formazione di dimeri ne contaminazioni....mentre ho ritrovato amplificazione nel mio controllo negativo (no DNA)!
come è possibile?
grazie mille
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Verina
Utente Junior
Città: Milano
285 Messaggi |
Inserito il - 09 giugno 2008 : 13:21:16
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| contaminazione? |
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gianpierolandolfi
Nuovo Arrivato
84 Messaggi |
 Inserito il - 09 giugno 2008 : 16:59:27
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potresti avere scambiato le happy (eppendorf) se nei tuoi campioni di controllo positivo non hai ottenuto niente.
Senn' come ha detto Verina molto probabilmente non avendo cambiato puntale hai contaminato... |
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Dionysos
Moderatore
Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 09 giugno 2008 : 17:02:46
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| Magari contaminazione accidentale del solo controllo negativo |
Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
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Topogigio77
Nuovo Arrivato
Città: Milano
37 Messaggi |
Inserito il - 11 giugno 2008 : 09:04:36
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concordo su contaminazione: cambia acqua o usa un'aliquota diversa di primers o una mix SYBR differente.
Ma non trovate che ormai, con i costi a reazione ormai irrisori delle sonde TaqMan, ormai non valga più la pena fare SYBR? Incideranno per 5 centesimi a reazione, ma non devi mettere a punto nulla...boh, parere mio... |
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magda1981
Nuovo Arrivato
19 Messaggi |
Inserito il - 18 giugno 2008 : 12:09:10
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grazie!
penso contaminazione mix sybr green.....
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real time pcr
Didattica
