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lallabell
Nuovo Arrivato
24 Messaggi |
 Inserito il - 11 luglio 2008 : 16:13:44
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chi è così gentile da dirmi perchè i primer nella RT-PCR li chiamano for e rev se la direzione di sintesi è sempr 5'-3'? o si referisce ad altro?
grazie mille
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 11 luglio 2008 : 18:12:46
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RT = retrotrascrizione
PCR = PCR
RT-PCR = retrotrascrizione seguita da PCR!!!
I primers quindi sono come per la PCR forward e reverse!!!
Citazione:
Messaggio inserito da lallabell
...se la direzione di sintesi è sempr 5'-3'?
La direzione di sintesi è comunque sempre 5'-3', ma delle sequenze si considera solo il filamento principale (filamento stampo), quindi se hai la sequenza:
5'- AATGATCGTGTCGATGCTACCCTGATGCTAGTC-3'
è ovvio che in realtà sarà:
5'- AATGATCGTGTCGATGCTACCCTGATGCTAGTC-3'
3'- TTACTAGCACAGCTACGATGGGACTACGATCAG-5'
Quindi il primer forward sarà uguale ad un pezzo di sequenza (ma si attaccherà allo strand 3'-5') e il reverse sarà invece coplementare e invertito rispetto alla sequenza. |
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lallabell
Nuovo Arrivato
24 Messaggi |
Inserito il - 12 luglio 2008 : 10:16:15
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ok capito, grazie  |
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RT-PCR
Didattica
