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simmysi
Nuovo Arrivato
Prov.: Bologna
Città: bologna
19 Messaggi |
 Inserito il - 28 luglio 2008 : 13:26:36
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Ciao
vorrei sapere se qualcuno ha esperienza in merito ad estrazioni di RNA
da midollo osseo? posso usare il TRIZOL ? conoscete qualche protocollo ?
grazie in anticipo !
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simona |
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elly_
Utente Junior
400 Messaggi |
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Topogigio77
Nuovo Arrivato
Città: Milano
37 Messaggi |
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simmysi
Nuovo Arrivato
Prov.: Bologna
Città: bologna
19 Messaggi |
Inserito il - 01 settembre 2008 : 18:53:29
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| grazie a tutti |
simona |
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Angela Cuzzocrea
Nuovo Arrivato
Città: milano
4 Messaggi |
Inserito il - 04 settembre 2008 : 09:38:48
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Ciao, io ti posso aiutare ho usato per anni il trizol, è facilissimo esegui dettagliatamente quanto è indicato nel foglietto che ti viene consegnato insieme con il prodotto. Ilsegreto per avere la massima efficienza e purezza è quello di lavorare in ghiaccio, cioè il tuo campione di midollo osseo lo devi prettrattare. Si procede così:
il prelievo di midollo è ricco di frustoli, purifica il campione usando una siringa da insulina in modo tale da separare i frustoli dalle cellule, a questo punto sul materiale così purificato esegui un fycoll e non superare i 2000rpm per 20', preleva l'anello di globuli bianchi che conterrà anche le staminali, conta le cellule e per 1 ml di Trizol risospendi NON meno di 5 milioni di cellule. Nota bene che è determinante agitare la provetta dopo che hai risospeso le cellule nel trizol, quindi attenti 10' esatti e congela subito. Quando andrai a riprendere la stessa provetta assicurati che sia perfettamente scongelata lasciandola a temperatura ambiente quindi segui il protocollo. Durante l'estrazione da Trizol RICORDA di lavorare in ghiaccio.ciao ed in bocca al lupo |
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Topogigio77
Nuovo Arrivato
Città: Milano
37 Messaggi |
Inserito il - 04 settembre 2008 : 10:53:42
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mitico, grazie Angela per i preziosi suggerimenti
ciao 
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ESTRAZIONE RNA da MIDOLLO OSSEO
Didattica
