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mikeee
Nuovo Arrivato

18 Messaggi

Inserito il - 05 agosto 2008 : 13:11:03

ciao a tutti!
ho bisogno di un piccolo parere. dopo una prima reazione RT-PCR di 25 cicli mi sono accorto che questi sono insufficienti, quindi ho provato a far ripartire la reazione per altri 3 cicli aggiuntivi. (con volume ridotto alla met�) il risultato che ottengo � attendibile? alla fine la concentrazione dei reagenti resta invariata..

elly_
Utente Junior

400 Messaggi

Inserito il - 05 agosto 2008 : 14:03:44

credo di si', si fanno pcr anche diluendo 1:5

Dionysos
Moderatore

Citt�: Heidelberg

1913 Messaggi

Inserito il - 05 agosto 2008 : 19:43:51

Secondo me 'attendibile' � una parola grossa: diciamo che ti pu�
essere utile per capire qual'� il numero di cicli pi� adatto.
Poi per�, fossi in te, ripeterei la PCR per avere un risultato
pi� "pulito" o quantomeno pi� certo. E' vero che la concentrazione
resta invariata, ma questo come dice elly non � importante: piuttosto
avendo prelevato del volume hai sicuramente aumentato la probabilit�
di contaminazione, degradazione del prodotto ecc. Insomma se cerchi un
risultato attendibile al 100%, dovresti fare la PCR daccapo dopo aver
individuato il numero di cicli sufficiente.

Volere libera : questa � la vera dottrina della volont� e della libert�
(F.W. Nietzsche)

Less Jim Morrison, more Sean Morrison!

mikeee
Nuovo Arrivato

18 Messaggi

Inserito il - 06 agosto 2008 : 16:47:47

Grazie!...nonostante sembra essere venuta bene la ripeter�!