Ciao a tutti, sto facendo una quantificazione dell'intensità per cellula di una proteina marcata tramite immunoistochimica (DAB). tramite imageJ, clicco su ogni cellula e ricevo l'intensità della proteina in quella cellula.
Mi chiedo una cosa: quando faccio la stessa cosa ma con marcatura fluorescente, calcolo il fondo (tutto ciò che non è nelle cellule) e poi lo sottraggo all'intensità di ogni cellula misurata. Ma con marcatura tramite DAB, come faccio a eliminare il fondo dalla mia analisi dato che è misurato tramite scala logaritmica dal programma? (per imageJ il bianco viene misurato 100, il nero 1, per esempio). Devo aggiungerlo all'intensità delle cellule?
dunque, la domanda è: dato che con la fluorescenza sottraggo il fondo per la misura delle intensità, con la DAB aggiungo il fondo alle misure di intensità?
Nero con fluo: 100; bianco con fluo:1 Nero con DAB: 1; bianco con DAB:100